s
19 708 Pages

L 'immunohistochimie Il est une technique qui joue un rôle très important dans la routine de laboratoire anatomie pathologique; Il est en effet en mesure d'identifier des molécules ou des structures spécifiques du compartiment cellulaire intra et extra. La technique immunohistochimique est basée sur le principe de la conjugaison anticorps-antigène en plus alors avec les systèmes de détection (enzymatique, fluorescent) qui rendent la réaction a eu lieu sous le microscope visible. Il existe des méthodes directes et indirectes.

description

Dans les méthodes directes en utilisant un seul anticorps à la molécule à trouver et ce même anticorps se lie une substance colorée qui permet de visualiser. Dans les méthodes indirectes utilisant deux anticorps: une dirigée contre la molécule à fouiller le second conjugué à la substance colorée, il se liera au premier anticorps.

La molécule se trouve dans la section du tissu en cours d'examen est reconnu par un anticorps produit par un animal immunisé contre cette molécule. Dans les procédés indirects, il est nécessaire que le second anticorps provenant d'espèces différentes de celle à partir de laquelle il a été le principal produit car sinon il ne serait pas reconnu comme antigène. Dans ces procédés, l'anticorps primaire est l'antigène d'être reconnu par le secondaire.

Aujourd'hui, à la place des anticorps secondaires, en utilisant des polymères (dextran) Les produits par des techniques d'ingénierie qui sont constitués de chaînes de sucres liés par des anticorps et des colorants simultanément. Une application possible serait le point culminant kératine dans un tumeur cellule broche et faire le diagnostic différentiel entre sarcomes et carcinomes dont les cellules vont se rencontrer épithéliale-mésenchymateuse transition.

techniques utilisées

La technique, à partir de la diapositive déjà mis en place, vous pouvez être brièvement résumée comme suit:

  • récupération antigénique dans le cas où l'antigène à rechercher a été modifié ou masqué par les techniques de préparation des lames;
  • l'inhibition des enzymes et d'autres substances endogènes qui peuvent traverser réagir avec les méthodes de coloration utilisées;
  • incubation avec un anticorps primaire;
  • développement de couleur si le procédé est dirigé;
  • incubation avec un anticorps secondaire (ou polymère conjugué) si la méthode est indirect;
  • développement de la couleur.

La technique est mise en oeuvre après la section fixe sur le chariot, il est alors mis à réagir avec l 'anticorps monoclonal spécifique pour la substance que vous recherchez. Selon la technique est également possible d'utiliser deux anticorps contre le premier 'antigène et le second anti-Fc (partie constante de la chaîne lourde de immunoglobuline); Il est donné que l'anticorps est associé à un enzyme (Très souvent peroxydase raifort) ce fractionnement sa couleur de substrat avec les zones de l'article obtenu du champ où la substance est présente et les rend visibles au microscope optique que les zones brunes.

D'autres techniques similaires immunologiques pour la coloration sont les diapositivesimmunofluorescence (Qui utilise Ig marqué par fluorochromes au lieu d'une enzyme), La conjugaison d'anticorps avec des substances radioactives (aujourd'hui sous-utilisés techniques parce que les méthodes chimiques sont plus sensibles, moins dangereux et ne nécessite pas de personnel spécialisé dans le traitement des radio-isotopes) et la microscopie électronique, il est possible de combiner les ig avec des particules d'or colloïdales pour moi, je suis radiopaque (cette technique aussi peu utilisée).

D'autres projets

Activité wiki récente

Aidez-nous à améliorer BooWiki
Commencez